平板计数琼脂平板
关键词: 平板计数琼脂平板 培养皿
2024.09.29
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硫乙醇酸盐流体培养基(FT)是一种专门用于培养需氧、厌氧和微需氧微生物的培养基,尤其适合作为培养厌氧菌的优先培养基。以下是硫乙醇酸盐流体培养基的一些主要特点:1.**多方面的营养**:培养基中包含胰酪胨和酵母浸粉,提供氮源以及合成蛋白质所需的氨基酸和生长因子;葡萄糖作为碳源和能源;氯化钠维持渗透压平衡。2.**氧含量梯度环境**:培养基的不同深度可以模拟有氧、弱氧至无氧的环境,从而满足厌氧细菌、兼性厌氧细菌和好氧菌的生长需求。3.**降低氧化还原电位**:胱氨酸、硫乙醇酸盐和葡萄糖可以降低氧化还原电位,防止过氧化物积累对某些细菌产生毒性,有利于厌氧菌的生长。4.**钝化重金属防腐剂**:硫乙醇酸盐具有钝化含砷和汞等重金属防腐剂的有害作用。5.**氧化还原指示剂**:刃天青作为氧化还原指示剂,氧化时呈红色,还原时无色,有助于监测培养基的氧化还原状态。6.**琼脂的作用**:少量的琼脂可以防止液体对流,有利于厌氧环境的形成。7.**制作简便**:培养基成分相对简单,易于制备。8.**流动性特点**:由于含有少量琼脂,其流动性与普通液体培养基有所区别。对乙酰胺琼脂培养皿(Tryptone Soya Agar plate,简称TSA培养皿)是一种常用的微生物培养基。平板计数琼脂平板
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基是一种专门用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)活性的培养基,具有以下特点:1.**荧光检测**:MUG作为荧光底物,在β-葡萄糖醛酸苷酶作用下,裂解后产生蓝色荧光终产物,可通过紫外线监测。2.**应用广**:MUG培养基用于荧光检测大鼠体内的β-葡萄糖醛酸苷酶基因表达,也用于植物中葡萄糖醛酸酶基因的表达进行荧光检测。3.**产品特性**:MUG具有纯度≥99%,熔点102°C,分子量为352.29(无水基础),在冷冻(-20℃)条件下储存。4.**培养基配方**:包含蛋白胨、磷酸盐缓冲系统、硫酸锰、亚硫酸钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、氯化钠、氯化钙和MUG等成分,pH值控制在7.3±0.1(25℃)。5.**操作步骤**:包括称取培养基粉末溶解、分装、灭菌、接种质控菌液、培养和观察有无荧光等步骤。6.**试验现象**:接种大肠埃希氏菌等质控菌株,在30-35℃培养后,通过366nm紫外灯下观察有无荧光,再滴加靛基质试剂观察有无玫红色环出现。7.**安全性**:操作MUG时应穿实验服并戴一次性手套,以确保安全。8.**应用示例**:包括细菌培养物的荧光检测和转基因植物GUS基因的表达测定。9.**储存与运输**:MUG培养基应-20℃干燥保存,有效期2年,运输时使用冰袋。改良亚硫酸盐琼脂培养皿TTC的显色作用可以使大肠埃希菌等产生红色的菌落。
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(又称为紫红胆盐葡萄糖琼脂,Kovac'sAgar)是一种选择性培养基,用于分离和鉴定肠道细菌,尤其是大肠杆菌和其他发酵乳糖的革兰氏阴性杆菌。以下是这种培养基的一些特点:1.**选择性**:胆盐成分具有抑制某些细菌生长的作用,特别是对革兰氏阳性细菌。2.**指示剂**:结晶紫和中性红作为pH指示剂,可以反映细菌发酵糖类产生的酸性代谢产物。3.**成分**:包含葡萄糖作为可发酵的碳源,乳糖可能作为次要碳源,胆盐作为选择性抑制剂,结晶紫和中性红作为颜色指示剂,以及琼脂作为凝固剂。4.**pH敏感性**:在细菌代谢过程中,如果产生酸性代谢产物,会使培养基的pH下降,导致颜色变化。5.**菌落特征**:发酵乳糖的细菌会产生酸性代谢产物,导致菌落周围出现紫色环,而不发酵乳糖的细菌则不会产生这种颜色变化。6.**应用**:用于临床样本、食品样本和其他环境样本中的大肠杆菌和其他发酵乳糖的革兰氏阴性杆菌的分离和鉴定。7.**制备方法**:通常按照制造商提供的配方称取培养基粉末,溶解在蒸馏水中,加热至沸腾以确保琼脂完全溶解,然后分装、灭菌,并在冷却至适当温度后倒板。
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。未来研究将进一步探索改良Letheen琼脂培养基在研究领域的优越性能,以及在微生物学实验设计中的灵活性。
Vogel-Johnson(V-J)琼脂基础是一种用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)选择性分离培养的培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:V-J琼脂基础包含明胶蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚红、磷酸氢二钾、氯化锂、甘氨酸和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素以及凝固剂。2.**选择性**:甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长。3.**鉴别特性**:金黄色葡萄球菌能够还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。4.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),适合金黄色葡萄球菌的生长。5.**使用方法**:称取V-J琼脂基础粉末,溶解于蒸馏水中,煮沸后高压灭菌。冷却至45-50℃时加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀后倾注平板。6.**培养条件**:接种后的培养基通常在30-35℃下需氧培养24-48小时。7.**结果观察**:金黄色葡萄球菌在V-J琼脂上通常形成黑色菌落,周围培养基变黄;而大肠埃希氏菌等非目标细菌则被抑制。8.**储存条件**:V-J琼脂基础应在避光、阴凉干燥处储存,使用后立即旋紧瓶盖,以保持其有效性。NAC琼脂培养皿可以用于微生物的计数和定量,通过培养皿计数法可以快速准确地确定微生物的数量。酵母粉琼脂平板
去氧胆酸是一种抑制肠道细菌生长的化合物,因此对于从非肠道来源中分离出的微生物具有选择性。平板计数琼脂平板
伊红美蓝琼脂(EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于大肠杆菌和其他肠杆菌科细菌的分离和鉴别。以下是伊红美蓝琼脂的特点介绍:1.**成分**:伊红美蓝琼脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、琼脂、伊红Y溶液和美蓝溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作为可发酵的糖类,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,而伊红和美蓝则作为pH指示剂。2.**pH值**:伊红美蓝琼脂的pH值为7.1,适合多数肠道细菌的生长。3.**制法**:首先将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH值后进行高压灭菌。使用前加入乳糖并加热溶化琼脂,冷却至50-55℃时加入伊红和美蓝溶液,摇匀后倾注平板。4.**用途**:主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别。大肠杆菌在该培养基上分解乳糖产酸,菌落呈深紫色并带有金属光泽;而产气肠杆菌则可能呈现棕色,很少有金属光泽。5.**保存**:伊红美蓝琼脂应在4℃至8℃的条件下保存,避免冻结,以保持其有效性。6.**有效期**:在适当的贮存条件下,伊红美蓝琼脂的有效期通常为三个月。
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