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四川小鼠免疫组化要多久

关键词: 四川小鼠免疫组化要多久 免疫组化

2025.04.07

文章来源:南京英瀚斯生物科技有限公司

病理医师日常工作中经常说的一句话应该就是“做个免疫组化吧”;不管是临床医师,还是患者,他们问的多的问题则是“为什么要做免疫组化?”病理医师通过“特殊染色”来进行细胞的识别。这一做法的依据是特定细胞和组织中的成分不同、则化学性质不同,通过染色的方法则可以呈现不同颜色。不过,由于组织固定或储存等,会造成相应物质的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的应用。随着免疫学研究的进展,根据抗原与相应抗体间特异性结合的性质,则有了现在免疫组化的方法:不同细胞、不同组织中抗原有一定差异,抗体与被测组织中的特定抗原结合,进而通过一定显色方法将结合的抗体显示出来。如有相应显色,则证实可能有被测抗原;无显色则可能无被测抗原。当然,这一方法中需注意相应的“例外”,如抗体的非特异性结合、非特异性显色,则容易造成“假阳性”;或者虽有相关抗原、但所用抗体与该抗原并未结合等,则容易造成“假阴性”。随着免疫组化的应用经验的增加,这些问题在常规应用中尽量得以避免,前者如各种显色方法的优化;后者如抗原修复方法的优化、新型抗体开发及选择。英瀚斯生物自有专业病理染色实验室,可做免疫组化。四川小鼠免疫组化要多久

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英瀚斯生物为您整理免疫组化实验步骤

1、石蜡切片置于65℃烘箱中烘片2h,脱蜡至水,用PBS冲洗三次,每次5min。

2、切片置于EDTA缓冲液中微波修复,中火至沸后断电,间隔10min低火至沸。

3、自然冷却后PBS洗3次,每次5min。4、切片放入3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶。

5、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封闭20min(封闭电荷)。

6、去除BSA液,每张切片加入50μl稀释的一抗覆盖组织,4℃过夜。

7、PBS洗3次,每次5min。

8、去除PBS液,每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗,4℃孵育50min。

9、PBS洗3次,每次5min。

10、去除PBS液,每张切片加50-100μl新鲜配制DAB溶液,显微镜控制显色。

11、显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,1%盐酸酒精分化(1s),自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。

12、切片经过梯度酒精(70-100%)10min一个梯度,脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固。 辽宁什么是免疫组化在南京英瀚斯做的免疫组化,效果不错!

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免疫组化结果要如何分析?

 (1)阳性着色细胞计数法。在40*光镜下,随机选择不重叠的10个视野,机器或人工计数阳性着色细胞,每组3~6张不同动物组织切片,然后进行组间比较即可。

(2)灰密度分析法。可以通过在不同组别和不同动物组织切片上选择相同区域、相同条件下用image j进行灰密度分析,然后进行统计分析即可。

(3)评分法。用光学显微镜下对组织切片分别按染色程度(0~3分为阴性着色、淡黄色、浅褐色、深褐色)、阳性范围进行评分(1~4分为0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),**终可以分数相加,再进行比较。对于以上这几种方法,各有利弊,请细心选择。要想得到正确结果的前提是你要做出着色均匀、背景很浅的高质量切片。


英瀚斯生物,专业病理染色团队,不止做检测,还有专业病理分析。

细胞爬片免疫组化检测实验步骤

1、选择贴壁良好的细胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。

2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶。

4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封闭20min(封闭电荷)。

5、去除BSA液,每张切片加入50μl稀释的一抗覆盖组织,4℃过夜。

6、PBS洗3次,每次5min。


英瀚斯生物,细胞、动物、临床样本免疫组化检测都可完成!


7、去除PBS液,每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗,4℃孵育50min。

8、PBS洗3次,每次5min。

9、去除PBS液,每张切片加50-100μl新鲜配制DAB溶液,显微镜控制显色。

10、显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,1%盐酸酒精分化(1s),自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。

11、切片经过梯度酒精(70-100%)10min一个梯度,脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固。 英瀚斯生物,可做免疫组化定量分析。

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免疫组化临床应用中,可以对传染性疾病诊断。应用抗病毒、细菌、zhen菌和寄生虫抗原的特异性抗体进行免疫组化染色,可以检测和诊断许多传染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨细胞病毒(CMV)、人乳T状瘤病毒(HPV)、疱疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、细小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS)等等,由于免疫组化在传染性疾病诊断中具有及时性、低风险性、高敏感性、特异性、有效性等特点,可以用于(1)用于人类新病原微生物的识别;(2)提供快速的形态学诊断,使严重传染性疾病得以早期医疗;(3)在无法取得新鲜组织或尚无培养方法的情况下,提供诊断并对发病机制进行研究和认识。英瀚斯生物专业做实验外包服务,一站式医学科研平台。常见的免疫组化方法有哪些?黑龙江病理免疫组化价格

如何做好免疫组化实验?四川小鼠免疫组化要多久

关于免疫组化,抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。南京英瀚斯生物科技有限公司有设计免疫组化的实验哦!如果您对此有希望了解更多,可以与我们联系!四川小鼠免疫组化要多久

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