连云港成瘤疾病动物模型建模

来源：ZSCI基础研究中如果加入动物实验部分则使得研究更加趋于完善，投稿时中稿率也相应会增加。但将动物实验做好却不是一件容易的事情。这篇文章主要讲动物模型的构建技术，把骨科、糖尿病相关的动物模型构建做了一个***的技术汇总，建议先码后读，文章内容有部分做了简化，想看详细讲解可以在文末获取课件！一、骨科相关动物模型1.骨关节炎1）骨关节炎模型构建方法（诱发性）-关节腔内手术法、关节腔注射法。2）模型评分标准①SafraninO染色与OARSI评分（PMID：31046827、30942801）②HE染色与OARSI评分（PMID：30609097）③SafraninO染色与Mankin评分（PMID：30609097）2.骨质疏松症1）骨关节炎模型构建方法去趋法模型PMID：31037128实验动物：小鼠方法：在戊巴比妥麻醉下进行双侧卵巢切除术以诱导骨质疏松症，同时对照组小鼠*进行卵巢外置但未切除。2）模型检测指标(PMID：31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相关指标检测3.类风湿性关节炎类风湿性关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病状态，其特征是滑膜增生，软骨退化和脊椎关节的骨侵蚀4.强直性脊柱炎1）强直性脊柱炎模型构建方法2）模型检测指标。大鼠疾病建模请找上海东寰。连云港成瘤疾病动物模型建模

PMID：15082495、7561688)①HE染色②关节侧视图③PCR鉴定、二、糖尿病相关动物模型1.糖尿病***1）模型构建（PMID：30826357）使用链佐星（STZ）注射ApoE-/-小鼠，建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型，同时与ApoE-/-小鼠采用高脂喂养18周2）模型检测指标（PMID：29107826、28345659）3）生化指标检测4）超声检测5）主动脉染色检测2.糖尿病心肌病1）诱发性DCM模型模型构建（PMID：29732743）实验动物：大鼠方法：各大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1，pH，现配现用)，并给予高脂饲料进行喂养。①模型检测指标血糖检测②HE染色③超声心电图2）自发性1型DCM模型3）自发性2型DCM模型3.糖尿病视网膜病变1）模型构建PMID：30862093实验动物：小鼠方法：糖尿病雄性db/db（+/+Leprdb/J）小鼠。喂养至21周2）模型检测指标①胶质原纤维酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR组视网膜组织内核层及外核层结构松散，细胞排列紊乱GCL，神经节细胞层;INL，内核层;ONL，外核层三、动物模型构建总结1.临床资料合理性在纳入临床资料时，需关注特定疾病患者的流行病学趋势，即疾病易发年龄，男女比例等，同时需考虑是否与体重、基因表达等具有相关性。2.模型合理性选择合适，简便。黄浦区疾病动物模型建模公司便于研究者按实验目的需要随时采取各种样品。

pirb在轴突生长锥表达，位于富含肌动蛋白的前缘和synapsin免疫阳性的囊泡中，在神经元突起的表达呈点状分布。文献表明，pirb表达随年龄增加，特别是在老龄认知损伤的小鼠海马中，pirb能够抑制轴突再生和突触可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚体对海马长时程增强的破坏作用需要pirb的参与，在ad转基因模型中，pirb不仅参与成年小鼠记忆缺失，而且介导幼年小鼠视皮层突触可塑性的丢失。这些研究提示我们，pirb参与突触可塑性，抑制pirb可能对ad起到效应。

1、动物模型名称：固定制动致制动应激大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：180~220g6、实验动物环境：SPF级。1、实验方法：采用固定制动方法。大鼠每天固定5~6小时进行制动应激，连续制动40天。2、检测标准：模型组大鼠体重增长速度较正常对照缓慢；旷场试验的结果显示，造模结束时与正常对照组比较，模型组大鼠的水平穿越格数、垂直运动次数、理毛时间均减少，**格停留时间、粪便粒数均增加；ELISA的结果显示，造模结束时与正常对照组比较，模型组大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明显增高。上海东寰提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。

新华社上海4月9日电（记者张建松）利用先进的基因编辑技术，我国科学家在***神经性疾病的基础研究方面，取得重要进展。***在小鼠模型上，成功恢复长久性视力损伤小鼠的视力，同时还基本消除了帕金森模型小鼠的疾病症状。在科技部、国家自然科学基金委、中国科学院、上海市的相关项目资助下，由中国科学院脑科学与智能技术***创新中心（神经科学研究所）、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室杨辉研究组完成的这项研究，通过基因编辑技术，成功诱导胶质细胞“变身”为神经元。这为阿尔兹海默症、帕金森症、青光眼等众多神经退行性疾病的***，探索了一个新的途径。国际**学术期刊《细胞》8日在线发表了相关研究论文。人类的神经系统包含成百上千种不同类型的神经元。在成熟的神经系统中，神经元一般不会再生，一旦死亡，就是长久性的。而神经元的死亡，则会导致不同的神经退行性疾病。在常见的神经性疾病中，视神经节细胞死亡导致的长久性失明和多巴胺神经元死亡导致的帕金森症尤为特殊，它们都是由于特殊类型的神经元死亡所导致的。如何在成体中让视神经节细胞和多巴胺神经元获得再生？研究人员对小鼠模型的胶质细胞进行了基因编辑。动物疾病模型的另一个富有成效的用途。金山区提供疾病动物模型建模

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即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于，步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射浓度为30～100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是：本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法，本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交，可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。附图说明图1为本发明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位点的打靶质粒载体的构建图；图2为本发明pirb基因敲入的小鼠模型的构建方法的流程图；图3为本发明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr结果鉴定电泳图；图4为本发明f1代pirb敲入的小鼠验证pirb基因敲入效果的测序峰图；图5为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的方法示意图；图6为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的结果图。连云港成瘤疾病动物模型建模

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