山东琼脂灭菌 培养基制备器

微生物检验培养基制备的要点：培养基灭菌处理：分装完成的培养基应马上灭菌。其杀毒灭菌方式主要有三种类型：高压蒸汽灭菌方式，此方法可用于大多数耐热培养基。对于小份：使用121°C十五分钟；大份：121°C三十分钟；对于含碳水化合物的中.海培养基，需113~115°C十五分钟。灭菌以避免糖分的破坏。煮沸灭菌法方式，此方法可用于含有不耐高温物质的培养基。过滤除菌方式，过滤除菌，采用无菌技术定量添加培养基。血液和可以用无菌技术抽取并加入冷却至约五十度的培养基中。当中'海培养基中含有不耐热物质时可以使用此方法。培养基的过滤澄清液体培养基必须澄清，琼脂培养基也应透明无明显沉淀。山东琼脂灭菌 培养基制备器

培养基制备操作步骤：(一)准确称量试剂根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。(四)分装将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100～150ml)，塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。(五)灭菌培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。山东琼脂灭菌 培养基制备器培养基根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基。

培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。

种子培养基：种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌体长得粗壮，成为活力强的“种子”。所以种子培养基的营养成分要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也要高些，但总浓度以略稀薄为好，这样可达到较高的溶解氧，供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程中能维持稳定的pH，其组成还要根据不同菌种的生理特征而定。一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源，因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用，有利于菌体迅速生长，所以在种子培养基中常包括有机及无机氮源。较后一级的种子培养基的成分好好能较接近发酵培养基，这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应，快速生长。强力磁力搅拌培养基在内腔里混合的均匀性得到确保，并避免凝结。

配制好的培养基保存：灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，避免长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量，应该是在较长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存;倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完，应于冷藏保存，如果保存时间超过2天，应将其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期，应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发。有的培养基还含有素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。山东琼脂灭菌 培养基制备器

一般培养基用0.IMPa(121℃)维持15~30min即可彻底灭菌。山东琼脂灭菌 培养基制备器

杀毒灭菌方式主要有三种类型：⑴高压蒸汽灭菌方式，此方法可用于大多数耐热培养基。⑵煮沸灭菌法方式：此方法可用于含有不耐高温物质的培养基。⑶过滤除菌方式：过滤除菌，采用无菌技术定量添加培养基。血液和可以用无菌技术抽取并加入冷却至约五十度的培养基中。当培养基中含有不耐热物质时可以使用此方法。培养基倒入平板：将灭菌溶化的培养基冷却至五十度后，倒入无菌干燥的培养皿中。微生物培养基制备的温度不能太高，否则培养皿内盖容易形成过多的冷凝水。山东琼脂灭菌 培养基制备器

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