高纯度Exosome产品

外泌体定量和表征。研究外泌体的同行们（包括我）一直被外泌体的定量和表征所困扰，什么样的外泌体才是好的外泌体呢？是评估其活性？纯度？蛋白浓度？还是其他什么指标？或者说我们在做实验时，怎样对外泌体进行定量呢？这个可以说是进行外泌体实验的第一步，必须确定外泌体的量，才好判断实验变量是否影响外泌体的发生或者确定下游应用实验的给药剂量。你们是如何进行定量的呢？目前的外泌体定量方法有以下几种，分别是：纳米颗粒跟踪分析（NTA）、纳米流式、表面标志物的ELISA定量试剂盒、BCA或Bradford蛋白定量试剂盒。注：受认知所限，有没有涵盖的，欢迎补充。上述外泌体定量方法中，以BCA蛋白浓度测定应用的广，也容易得到（也就是可及性很高）。但是，但是我们分离的外泌体，因获取样本的不一致，每种样本中杂蛋白的含量不尽相同，同时分离方法也不一定相同，这就导致我们很难确定蛋白量与外泌体量的对应关系。所以，我们这些外泌体研究者就在两难之间不断横跳。为了解决这些困境，维思克思生物科技提供了整套外泌体鉴定技术服务、外泌体分离、示踪、保存、游离染料清qing除、蛋白定量、脂质定量、核酸定量等系列产品。外泌体研究工具全流程质量管控，从生产到售后，保障实验可靠性。高纯度Exosome产品

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。2.单一表征方法的局限性对外泌体的纯度表征目前采用的是外泌体阴性蛋白标志、颗粒蛋白比。外泌体阴性蛋白标志一般采用WB检测，属于定性检测，与样本处理、抗体、显色、曝光时间等多个因素有关，如果作为纯度表征的指标，显然是不合适的。在蛋白聚集体或其他杂质（糖/脂质/核酸等）聚集体/大颗粒较多时，颗粒蛋白比的数值也可能较大，其作为纯度表征指标也有其局限性。既然上述外泌体定量方法、表征方法具有其局限性，那么如何科学的对外泌体进行定量和表征呢？牛奶胞外囊泡科研外泌体研究工具专业技术支持，提供实验方案指导，降低技术门槛。

外泌体定量与表征的又一有效补充！外泌体脂质脂质定量试剂盒（比色法）外泌体由磷脂双分子层包裹，包含脂质等代谢物。目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。维思克思的WSR0028可用于外泌体的脂质定量，既可测定外泌体的脂质含量，为脂质研究提供有力工具，又能作为外泌体定量和表征方法的有效补充。现有的脂质定量方法大都需要昂贵的仪器，例如HPLC仪器、光散射检测技术等。本产品可替代这些仪器，实现小成本快速检测！产品特点：灵敏度高，检测脂质浓度下限达到5μg/mL。操作简便，需三步即可检测出脂质含量，整个操作时间不超过40min，节约时间。线性范围广，5-1000μg/mL浓度范围内有较好的线性范围。产品信息：ExosomalLipidQuantificationKit(Colorimetric)（WSR0028）。

EVs研究中，通常EVs来源，纯化方法，定量技术，给药对象等这些因素都会导致给药剂量的差异。因此建立一个完善给药剂量系统就显得尤为重要。确定EVs有效剂量建议分为两个方向，一个是长期层面；一个是短期层面。长期上需要众多EVs从业者，制定有效的、适用于不同来源、不同生产工艺、不同纯化方法的EVs量化或表征方法，这个层面无法短期内实现。在短期内，比较好购买商品化EVs，或者自己确定固定来源和生产工艺、定量方法的EVs，然后做细胞或动物的量效实验时，做梯度稀释的量效实验，以确定比较好的给药剂量，此方法可以。为尽快解决问题，达到预期实验效果，只能从短期层面考虑。维思克思在外泌体行业深耕近十年，总结出EVs剂量的方案：选用维思克思MSC/HEK293/NK/植物外泌体标准品可缩短时间，提高实验效率。外泌体标准品的来源、生产工艺、纯化方法等都为固定的，外泌体标准品需试验确定一次剂量即可，后续实验都可使用统一剂量。该种方法更为简便易得且节约时间。除商业化外泌体以外，同时还配套了外泌体研究相关产品，包括但不***于细胞培养基、外泌体分离、提取试剂盒、外泌体示踪试剂盒等产品。外泌体研究工具成熟技术体系，快速解决实验难题，降低研发周期成本。

外泌体标记真的只能用PKH和DiR吗？外泌体作为近几年的“科研新贵”，可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力，是非常有前途的递送载体。然而，目前在外泌体的示踪研究和应用上还存在一些难点：难点一：目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料(如：PKH、Dil等)，这些染料与外泌体膜不是共价结合，而是通过疏水相互作用短暂结合在一起的。在后续的细胞摄取时，会出现示踪染料在不同膜结构或脂溶性物质间发生不断解离和结合的现象，从而影响结果的准确性。ps：分离的外泌体中也会存在一些脂质，也会与示踪试剂结合。难点二：目前外泌体等胞外囊泡有一部分的归宿是在溶酶体，而溶酶体的酸性环境，绝大多数外泌体示踪染料发出的荧光都会淬灭，那么这一部分外泌体的去向就难以检测到。该外泌体示踪试剂盒来自维思克思生物科技，是该公司两项发明**转化而来，对比其他染色方法，该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势！产品信息：ExosomeWisTracker-IIKit（WSR0001-2）。外泌体研究工具小剂量包装设计，适合少量多次实验，减少试剂浪费。HEK293Extracellular Vesicles药物装载

外泌体研究工具高纯度原料制备，减少实验干扰因素，提升结果可靠性。高纯度Exosome产品

外泌体是科学研究的热点，可怎么才能追踪到外泌体在体内的踪迹呢？很多研究者都被这一点给难住了。尽管市面上已经有了许多追踪染料，但这些染料要么就是荧光信号太弱，要么就是背景太高，都存在很多不足。维思克思曾经也深受其害，经过长时间的沉淀与积累，我们终于带来由发明**“一种pH敏感型探针分子及其应用、一种探针分子的合成方法”转化而来的示踪试剂盒！外泌体标记步骤：1试剂准备。使用时将WisTracker提前从-20℃取出，避光解冻后备用。2标记外泌体。将解冻后的WisTracker添加到外泌体溶液中，室温避光反应30min。3游离探针的去除。推荐用维思克思的WSR0015一步普通离心去除游离探针，得到纯净的荧光标记外泌体。外泌体示踪步骤：1接种细胞。取合适密度的细胞，接种于共聚焦平皿中置于合适条件下培养。2孵育外泌体。细胞计数，当细胞生长到70%时，加入荧光标记的外泌体于细胞培养条件下避光孵育2-4h。3清洗与染色。取出平皿，用PBS清洗3次，加入DAPI溶液，室温避光孵育10min，孵育完成后再用PBS清洗3次。4荧光检测。在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体，并拍照记录。高纯度Exosome产品

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