广东中盐核酸酶70950-202

慢病毒大规模纯化的捕获步骤包括：膜过滤澄清，随后切向流过滤/超滤或者体积排阻色谱浓缩。此外，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中盐核酸酶）来去除细胞残留的、质粒来源的DNA污染。这两个步骤顺序可以调整，依据项目工艺而定。两种工艺路线各有优缺点：先用核酸酶消化的优点是可去除大的DNA片段，且后续步骤可以去除残留核酸酶；但所用的核酸酶的量也非常大。与此相反，将核酸酶步骤后置的优点是大幅降低核酸酶的量(成本降低)；但后面的步骤必须有将核酸酶去除的能力。此外，后期用核酸酶的缺点是核酸污染可能会结合慢病毒颗粒形成沉淀，进而导致慢病毒在纯化中流失，从而影响得率。M-SAN HQ ELISA Kit能够定量检测M-SAN HQ中盐核酸酶残留。广东中盐核酸酶70950-202

在不同的盐浓度条件下，AAV病毒载体的存在形式不同。低盐浓度条件下，AAV病毒颗粒表面会通过电荷作用等非特异结合到HCD上，从而产生病毒颗粒团聚现象。随着溶液盐浓度上升，AAV病毒颗粒与HCD的离子相互作用会被破坏，AAV病毒颗粒会逐渐解离。当盐浓度升到更高范围（>400mM左右），AAV病毒颗粒与HCD的结合更弱，AAV颗粒更稳定。因此，在高盐浓度溶液中，AAV颗粒更加稳定，且有数据表明高盐浓度不会削弱AAV的侵染能力。所以，我们推荐提高AAV病毒生产中的盐浓度。河北ArcticZymes中盐核酸酶在已有工艺中，不需做任何调整，用中盐核酸酶能够完全替换全能核酸酶，且去除HCD效率更高；

ArcticZymes Technologies产品大都来源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 热不稳定性，使酶产品相对容易失活，简化工作流程，方便自动化过程；2. 低温活性，即在低温或常温下具有更高活性，缩短酶与底物的孵育时间，提高反应速度及效率；3. 耐盐特性，是指大部分酶产品能耐受较高的盐浓度，拓宽反应体系范围选择，在特殊体系的应用场景下具有更为出色的性能表现；4. 独特特性，极限酶类产品能够在非常规条件下进行酶促反应，让一些反应从不可能变为可能。

M-SAN HQ中盐核酸酶发挥酶活性的条件比较广。例如，该酶适宜的盐浓度（NaCl）范围是0mM-225mM，能耐受400mM NaCl浓度。适宜反应温度为20℃-37℃，能耐受4℃-40℃。Mg2+浓度大于0.5mM即可，在4-15mM范围即可表现更高活性。跟其他核酸酶不同，M-SAN HQ中盐核酸酶不是碱性核酸酶，其适宜pH为7.2-8.7，能耐受6.3-8.7。综合这些特点，在生理盐条件下，M-SAN HQ的酶活是传统全能核酸酶的5倍左右。因此，可以说M-SAN HQ是更适合生理盐条件下的核酸酶。ArcticZymes厂家管控整个供应链及生产流程，协助客户进行文件审计及现场审计。

在生物工艺流程中，需要使用核酸酶去除终产品中的核酸污染，而核酸酶作为外源成份，也需要在生产流程中去除。核酸酶去除工艺包括热灭活法、酶抑制剂、离子交换和亲合层析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右，包装了完整基因组DNA后的AAV病毒颗粒PI大致为5.9，来自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右，M-SAN HQ中盐核酸酶pI 8.7左右。因此，在同样的条件下，从LV/AAV溶液中去除M-SAN HQ中盐核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更彻底。M-SAN HQ中盐核酸酶更适合细胞基因drug（如AAV、LVV、RV及OV等）的生产。上海生理盐条件中盐核酸酶

M-SAN HQ中盐核酸酶用在生产工艺流程中，在生理盐条件下去除双链及单链的DNA及RNA。广东中盐核酸酶70950-202

对于含包膜的病毒载体，如慢病毒LV、逆转录病毒RV等，在细胞培养上清液中收获。而M-SAN HQ中盐核酸酶，作为市场上更适合生理盐条件的核酸酶，所以，M-SAN HQ成了包膜病毒载体生产的更好选择。优势在于：1. M-SAN HQ兼容多种细胞培养体系，在细胞培养盐浓度条件下具有更优活性；2. M-SAN HQ酶活更高、酶切速度更快，缩短孵育时间；3. M-SAN HQ能够高效剪切染色质到更小片段，简化下游工艺流程；4. 相比Benzonase，M-SAN HQ用量减少1/2-2/3，降低了酶用量及生产成本。广东中盐核酸酶70950-202