湖北咽拭子口腔拭子供应商

    下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因GAPDH进行荧光PCR扩增，方法如下：将采血管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①：50℃，2min，循环1次。步骤②：95℃，5min，循环1次。步骤③：95℃15s，55℃30s（收集荧光），循环40次。结果分析：平行扩增的荧光定量PCR反应中，阴性对照无扩增，说明反应体系正常，无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本，然后用人管家基因GAPDH引物进行荧光PCR扩增检测，结果如图1所示。 一个合格的口腔拭子他应该是很洁净、没有臭味的，摸上去应该是柔软的，不能有黄斑、污迹或者是异物的。湖北咽拭子口腔拭子供应商

    本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将采血管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。浙江正规口腔拭子源头厂家这款口腔拭子用起来超级便捷：专利一体化设计，更容易操作。

    本发明涉及生物医药领域，涉及一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技术：近年来，采用口腔拭子进行DNA检验有逐渐增多的趋势，由于国内没有专门用于采集口腔脱落细胞的工具，而只是使用普通的医用棉签，而不同的人采集口腔脱落细胞在擦拭次数、力度、检材剪取量及扩增用的模板量上都存在一定差异，导致了口腔拭子的DNA常温下保存效果不大稳定，影响了口腔拭子在DNA常温下保存中的应用。

为规范口腔拭子DNA的采集，提高口腔拭子的DNA保存效率，亟需一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。

    1根微细型鼻咽植绒拭子50支/盒6盒/箱货号产品名称规格902CSRK涂抹棒取样盒（配有1个SRK稀释液10ml的自立管、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子）25支/盒902C2SRK涂抹棒取样盒（配有1个SRK稀释液10ml的自立管、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子）250支/箱905CSRK涂抹棒取样盒（配有培养基自立管、涂抹棒粘胶纤维拭子、取样模具10*10cm各1个）10套/盒908CSRK涂抹棒取样盒（配有1个SRK稀释液、1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子）25支/盒167KS01塑料单独包装（1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子）1000支/箱155C管装单独包装（1个塑料涂抹棒粘胶纤维拭子）1000支/箱922CSRK取样运送管（配有10ml稀释液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子，独立包装于无菌袋里）1支/包926CSRK取样运送管（配有10ml稀释液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子）50支/盒929CSRK取样试剂盒（配有letheen肉汤培养基、适用于petrifilm纸片平板计数）50支/盒947CSRK取样运送管（配有4ml通用中和液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子）50支/盒947C2SRK取样运送管（配有4ml通用中和液、1个9cm塑料涂抹棒粘胶拭子）300支/箱938CSRK471取样盒（每小袋配有10ml稀释液、8个管装塑料涂抹棒聚酯纤维拭子）25支/盒954CSRKPHARMA，塑料涂抹棒。口腔拭子如果在使用的过程中出现过敏现象，请立即停止使用，严重时请及时就医。

    紫蓝色结节、瘘孔等，分泌物量、性质、颜色、气味等，阴道有无横隔、纵隔、斜隔、狭窄、闭锁、双阴道等畸形，宫颈大小、形状、色泽，有无糜烂、旧裂、赘生物、紫蓝色结节及接触性出血等，宫颈管分泌物性状，宫颈阴道段长度及双宫颈畸形等。盆腔检查检查前先排便，排便困难者可先导尿及服用缓泻剂，有阴道出血者需先消毒外阴并戴无菌手套；月经期一般不做盆腔及阴道检查；未婚者一般仅作肛门指诊检查。

（1）双合诊：即阴道腹部双合诊。检查者戴无菌手套，以示指、中指蘸润滑液后顺阴道后壁轻轻插入，检查阴道有无肿块、狭窄、瘢痕、弹性等，子宫颈高度、大小、质地、硬度，有无举痛，后穹窿是否饱满，软硬度，有无弹性，结节、肿块、浸润、触痛。然后将另1手置于下腹壁与阴道内手指配合检查盆腔生殖器先作宫体触诊，注意子宫体大小、位置、形状、硬度、活动度及有无压痛。将内诊指放在一侧穹窿，双手检查附件与宫旁组织有无增厚、压痛、包块，如有肿块需查清大小、活动度、质地、形状，有无触痛以及与子宫有无粘连，有无向周围组织脏器浸润等，先查不痛的一侧，然后再查对侧。

（2）三合诊：又称阴道直肠腹部三合诊。用示指插入阴道、中指插入肛门内触诊。 口腔拭子一旦有破损记得联系经销商或者厂商，及时沟通退换。浙江正规口腔拭子源头厂家

口腔拭子应该持续15s而不产生长久变形或者折断的现象。湖北咽拭子口腔拭子供应商

    所有反应孔背景信号好、Ct值都在19～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型，说明本发明实例1提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法具有较好的可行性。将四份不同来源不同的人血液样本进行荧光PCR扩增检测，每份样本平行三次，结果分别如图2、图3、图4、图5所示，由图可见，每个样本的平行实验，其曲线的Ct值很接近且≤25。说明本发明实例提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法有可靠的重复性以及较好的均一性。实施例2与市场现有的血液基因组提取试剂盒产品对比。本发明的具体步骤如下：将采血管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂（20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺），涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。选用某公司的血液基因组提取试剂盒作为方法比对，具体操作过程：将取血管颠倒混匀数次，吸取200μL血液于。湖北咽拭子口腔拭子供应商

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