国内病毒全基因组测序分析原理

    全基因组测序需要要注意的事项包括：全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。技术路线：提取基因组DNA，然后随机打断，电泳回收所需长度的DNA的片段（），加上接头,进行DNA簇（Cluster）制备，后利用Paired-End（Solexa）或者Mate-Pair（SOLiD）的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig，通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold，进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。常用的组装有：SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。测序深度（Sequencingdepth）是指测序得到的碱基总量（bp）与基因组大小的比值，它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系，测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体，如果采用的是双末端或Mate-Pair方案，当测序深度在50X~100X以上时，基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证，后续序列组装成染色体才能变得更容易与准确。 二代测序可以用于对病毒的全基因组进行测序有哪些挑战？国内病毒全基因组测序分析原理

深度测序技术对经济市场的影响：未来社会的创新驱动将由信息技术向心理社会健康方面转移。可以预见，全球老年化社会到来后的经济主战场将是健康行业，而以基因测序预测健康和临床准确分型的市场将会越来越大。深度测序相关的经济市场有两个方面。一是测序仪器和技术相关的市场，二是测序应用市场的竞争。一个显见的例子是，近年来深度测序技术促进了对肺病的进一步认识和分型，更多的位点突变如ALK、ERCC1、MET、PI3K、RRM1等被陆续发现，多基因检测肺病致病驱动基因对医生准确选择靶向药物十分重要。以肺病中常见的EGFR突变型为例，对于敏感性基因突变（19Del+L858R），第1代靶向药物（如易瑞沙等）可以进行良好的调整和控制；但是对于耐药性基因突变（T790M），则需要第三代靶向药物（AZD9291）才有较好的临床效果。不久的将来，病症患者将获得更具个性化的药物，从而达到准确医疗。杭州全基因组病毒测序分析排行全国开设病毒相关测序的公司不超过5家。

深度测序技术对社会的影响：深度测序技术促进了基因检测的普及，对社会的影响第1个方面反映在商业模式的变化，即医学检验和健康管理方面的平民化、个性化趋势的形成。社会生活受到深度测序技术影响的第二个方面是基因测序的普遍应用。例如，基因关联将人与人通过遗传学关联起来，人们可以对基因进行分析判定亲缘关系，基因测定甚至可以帮助判定婚姻（包括遗传病等方面的）匹配度。公安机关可以通过基因比对，锁定犯罪嫌疑人、寻找丢散的儿童和亲人。甚至有报道表明，测定20多个基因就可以将人脸重构。基因检测的应用将随着基因-表型的关联得到更普遍的应用，对社会生活的方方面面起到重要作用。

为了便于新发或罕见病毒性传染病的筛查检测,利用多重置换扩增技术,以负链RNA病毒—发热伴血小板减少综合征病毒和正链RNA病毒—登革病毒为模拟样本探索临床样本中RNA病毒基因组非特异性扩增方法。研究中通过梯度稀释的RNA病毒模拟样本中可能存在的不同丰度的病原体,样本核酸依次加工成单链cDNA,双链cDNA,T4DNA连接酶处理后的双链cDNA以及添加外源辅助RNA后合成并连接的双链cDNA形式,然后进行Phi29DNA聚合酶等温扩增,使用荧光定量PCR方法比较各种方法对RNA病毒核酸扩增的影响。病毒全基因组测序具有的特点:独有的一定定量技术，实现病原定量分析。

病毒（Virus）由一种核酸分子（DNA或RNA）与蛋白质（Protein）构成或由蛋白质构成（如朊病毒）。根据遗传物质的组成，可分为单链DNA病毒（ssDNA）、双链DNA病毒（dsDNA）、单链RNA病毒（ssRNA）、双链RNA病毒（dsRNA）和蛋白质病毒（如朊病毒）。根据宿主类型的不同，可以分为噬菌体（细菌病毒）、植物病毒（烟花叶病毒）和动物病毒（如禽流感病毒、天花病毒和HIV等）。病毒全基因组测序（VirusWholeGenomeSequencing，VWGS），是指基于第二代高通量测序技术，对病毒全基因组进行测序，利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因组序列，解析编码信息，并获得相应的变异信息。病毒全基因组测序基于PCR技术和抗原抗体技术的售后验证平台，致力于解决临床的每一个疑问。重庆病毒高通量测序突变分析技术

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病毒准种的漂变将使毒株的特点及传播方式发生改变，给现有的检测手段和防治措施带来严峻的挑战。新一代高通量测序技术的出现使得检测某个物种的混合PCR产物中低频率的变异体十分便利它的出现加快了研究准种的规律性和影响因素的步伐。新一代测序仪将以往的测序费用降低了好几个数量级。鉴于此，以前只有大型测序中心才能够开展的项目，现在在小型实验室里也能顺利进行了，按照目前的发展速度，新一代高通量测序技术有望给生物学和生物医学研究领域带来**性的变革。国内病毒全基因组测序分析原理