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    这里介绍热力消毒**法。高热破坏微生物蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致微生物死亡。受高热作用后，蛋白质分子运动加快，肽链连接键断裂，蛋白变性凝固；细胞膜功能受损使胞内物质漏出，**内外环境平衡失调。不同种类微生物对热的耐受力不同，多数无芽胞**经55-60℃作用30-60分钟后死亡，100℃时迅速死亡。有芽胞**则对高温有强的抵抗力，如肉毒芽胞梭菌煮沸需3—5小时才死亡。热力**分干热**法和湿热**法两大类，相同温度下后者较前告效力大，其原因是：①湿热环境中菌体蛋白易凝固；②湿热穿透力比干热大；③湿热蒸气变为液态时可释放潜热，迅速提高被**物体的温度。1．干热（dryheat）**法(1)焚烧。直接点燃或在焚烧炉内进行，*适用于废弃物品或动物尸体。(2)烧灼。直接以火焰**，适用于微生物学实验室接种环、针和试管口等**。(3)干烤。在干烤箱内进行，加热至150-180℃2-4小时达到**效果，适用于高温下不变质、不被破坏和不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器，不能用于塑料、棉、纸制品。2．湿热(moistheat)消毒**法(1)巴氏消毒法。巴氏消毒法(pasteurization)是用较低温度杀灭液体中的病原微生物或特定微生物而保持物品中所需的不耐热成分的方法。RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。河南基础培养基技术指导

    一）、实验室种子培养基**方法1、高压蒸汽**锅、手提式**锅。容量小。2、立式或卧式**锅。容量较大，一般能装几十瓶或几百瓶。3、**柜。要和蒸汽锅炉配套，用于大量种瓶培养基的**，一次能装几百至几千瓶(袋)。（二）、培养基的分批**1、定义：将配制好的培养基输入发酵罐中，用蒸汽加热，使培养基和设备同时**的一种**方式，又称实罐**。2、**过程过程包括升温、保温和冷却等三个阶段，各阶段对**的贡献：20%、75%、5%。培养基的升温可由两种方式实现：间接加热，在夹套或蛇管中通入蒸汽加热；直接加热，在培养基中直接通入热蒸汽加热。**过程中加热和保温阶段的**作用是主要的，而冷却阶段的**作用是次要的，一般很小，可以忽略不计。此外，还应指出的是，应当避免长时间的加热阶段，因为加热时间过长，不仅破坏营养物质，而且也有可能引起培养液中某些有害物质的生成，从而影响培养过程的顺利进行。在实际生产中，也可能遇到所供蒸汽不足、温度不够高的情况，这时可以适当延长**时间。生产上甚至有用100℃蒸煮而达到彻底**的实例。如要做固体曲而没有高温蒸汽时，可将原料用100蒸汽蒸30min，杀死其中的营养细胞，但孢子与**的芽孢没有被杀死。四川减血清培养基价格信息DMEM培养基在组织工程中有重要应用。

    培养实例2和对比培养例2的培养结果比较：兰兹贝格型拟南芥种子在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100％；在相同条件下培养28d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，在平均株高、莲座叶大小、根长、花朵数量等方面均优于1/2ms生长培养基；并且，采用上述培养方法，不论是1/2cs生长培养基还是1/2ms生长培养基，均能获得形态完整的花粉，且花粉活力高达％，其特点在于选择了兰兹贝格型拟南芥作为培养对象，且选择了高度适中的培养盒进行培养，克服了传统培养方法无法获得拟南芥整个生育期无菌苗的缺点，所获无菌花***可直接用于花*离体培养等研究内容。如图2所示。培养实例3：油菜无菌苗培养与培养实例1不同的地方在于：步骤(1)所用种子为中双11号油菜种子，其余完全同培养实例1。1/2cs生长培养基的培养结果为：中双11号油菜种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100％，培养9d的幼苗，表现为植株健壮、平均株高为，叶色浓绿，茎秆粗壮、平均茎中粗为，根系发达、平均根数为(>)、平均主根长为。如图3所示。对比培养例3：将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基，其余完全同培养实例3，1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。

    平衡盐溶液（balancedsaltsolution，BSS）简称盐溶液，集缓冲液的缓冲能力、生理盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体，兼具维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱度、同时供给细胞生存所必需的能量和无机离子成分的作用。各种BSS的缓冲系统有所不同，其中以Hank’s液和Earle’s液为例，它们主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的pH值。Eagles液在空气水平的CO2中，溶液会变碱，Hank’s液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存**，需要用Earle’s液，。如果**是清洗将要在细胞培养基中储存的**，用Hank’s液就可以了。表3-1几种常用的平衡盐溶液配方（g/L）一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成分，同时参与许多重要的细胞功能活动。但它们有使细胞凝集的作用，在配制分散细胞的消化液和特殊用途的细胞洗涤时，宜采用Ca2+、Mg2+含量较低的Dulbecco液或无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液，或者PBS液。概述基础细胞培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。无血清培养基适合于需要无血清环境的细胞系。

    在s3中，将s2中消毒的外植体接入诱导培养基中培养，诱导培养基的配方为ms+，诱导培养基的ph值为，在s4中，将s3中的无菌外植体转接到增殖培养基中，增殖培养基的配方为ms+～～，增殖培养基的ph值为，在s5中，将s4中的绣球组培苗放入生根培养基中，生根培养基的配方为1/2ms+～～，生根培养基ph值为。通过采用上述技术方案，通过液体**培养技术，以芽为原材料，获取方便，增殖倍率高达8～10倍，生根率达到95％以上，苗木规格整齐，性状保持稳定，同时节省成本，适合工厂化大规模生产质量绣球种苗。诱导培养基萌芽率能达到90％，可以成功建立无菌再生体系。使用本增殖培养基，绣球组培苗增殖倍率能够达到8～10倍，组培苗高度一致，生长健壮。使用本生根培养基，绣球组培苗生根率能够达到95％，根系发达，健壮，可以成功用于移栽大棚。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s3中，将s2中消毒的外植体接入诱导培养基中后的培养环境为在光照强度1500lux条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养6～8周。通过采用上述技术方案，在该培养条件下能够有效避免诱导培养阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应诱导培养基。减血清培养基减少了血清对细胞培养的干扰。广西减血清培养基市场报价

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