中国香港MEM培养基答疑解惑

    第三节培养基的高压**及效果验证消毒**在医学实践上有着重要意义。它可切断传播途径、控制***扩散造成的危害；也可杀灭物品或器皿上的**，防止医院***；在医学微生物检验的领域中，消毒**是保正***的病原学检验不受外来微生物污染的前提。（一）术语消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐（antisepsis）和无菌(asepsis)是常用术语。下面就术语概念加以叙述。(1)**。是用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。本法适用于制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的**。（如外科器械、注射器、基础培养基**等。）(2)消毒。是破坏物体上活的病原微生物的方法，但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡体温计、新洁尔灭液擦拭检查台等。用于消毒的化学物品称消毒剂(dis-infectant)。一般而言，消毒对象是指物体而不是机体。(3)防腐。直接使用防腐剂(antiseptics)破坏或**活的病原微牛物的方法。如外科手术前碘液擦洗皮肤、双氧水清创伤口或**肥皂清冼双手等。(4)无菌。防止***病原体进入****或物品的操作技术称无菌操作。无菌即为不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有热力、电离辐射、超声波、过滤等。F12培养基能够支持细胞的持续分裂。中国香港MEM培养基答疑解惑

    对于大多数哺乳类动物细胞，渗透压在260～320mOsm/kg的范围内都适宜。在生产、配制细胞培养基的过程中，渗透压的测定较为重要，有助于防止在生产、配制过程中出现称量等方面的错误。反应器高密度培养动物细胞过程，在添加碳酸氢钠的过程中注意渗透压的监控，防止渗透压过高对细胞的损害。温度温度对细胞培养基有较大的影响，温度过高可引起营养成份的降解或破坏，细胞培养基的pH、离子强度和电解常数pKa也可能受到影响。如细胞培养液中的谷氨酰胺，在高温条件下降解的速度较快，如35℃贮存时，放置3天降解25%左右，在4℃贮存3周降解约20%。粘滞性及表面张力含血清细胞培养液的粘滞性主要是由血清引起的，在转瓶培养贴壁细胞时，培养液的粘滞性对细胞生长没有多大影响；但在生物反应器悬浮培养细胞时，细胞培养液的粘滞性则直接影响搅拌转速控制及搅拌剪切力对细胞造成的损伤程度。表面张力对细胞培养有较大的作用，尤其在利用生物反应器进行悬浮培养时，搅拌和通气都会引起泡沫的产生。对于含血清培养液，由于血清中多种蛋白的存在，搅拌时产生的气泡较多，气泡的上升运动对细胞的损伤程度还有争议，但气泡的破裂对细胞有明显的损伤作用。为降低这种损伤。陕西F12培养基价格对比RPMI1640培养基含有多种关键营养成分，支持细胞生长。

    另外，酚红作为pH值的指示剂被加入到细胞培养基中。酚红在产物纯化过程中会造成干扰，并且具有一定的固醇类***样作用，如雌***样作用。当用于哺乳类动物细胞的培养，可能会发生一些固醇类反应。现在商业化细胞培养基中的酚红含量可根据需求调整。因生物反应器具有pH在线检测技术，生物反应器培养动物细胞时，酚红可完全去除。细胞保护剂是保护细胞免受渗透压变化、剪切力、氧化及气泡作用等引起的损伤的物质。在使用生物反应器培养动物细胞时，细胞易被机械搅拌和通气鼓泡产生的流体剪切力和气泡作用所伤害甚至破损死亡。为降低这种损伤，除优化生物反应器结构和生产工艺外，可在细胞培养液中添加一些保护剂。其主要是通过改变细胞培养基物性或是对细胞具有保护作用的物质，常用的种类有血清、白蛋白、聚已二醇（PEG）、非离子性表面活性剂PluronicF68或是其他一些高分子聚合物等。3.细胞培养基的理化性质动物细胞在细胞培养基中不仅能存活，还要分裂增殖，合适的渗透压、pH值等理化性质是细胞培养基必须具备的前提条件。动物细胞大多数需要轻微的碱性条件，适宜pH在～。细胞培养基的pH值通常需经校正的pH计来测定。在细胞生长过程中，随细胞数量的增多和代谢活动的加强。

    一）、实验室种子培养基**方法1、高压蒸汽**锅、手提式**锅。容量小。2、立式或卧式**锅。容量较大，一般能装几十瓶或几百瓶。3、**柜。要和蒸汽锅炉配套，用于大量种瓶培养基的**，一次能装几百至几千瓶(袋)。（二）、培养基的分批**1、定义：将配制好的培养基输入发酵罐中，用蒸汽加热，使培养基和设备同时**的一种**方式，又称实罐**。2、**过程过程包括升温、保温和冷却等三个阶段，各阶段对**的贡献：20%、75%、5%。培养基的升温可由两种方式实现：间接加热，在夹套或蛇管中通入蒸汽加热；直接加热，在培养基中直接通入热蒸汽加热。**过程中加热和保温阶段的**作用是主要的，而冷却阶段的**作用是次要的，一般很小，可以忽略不计。此外，还应指出的是，应当避免长时间的加热阶段，因为加热时间过长，不仅破坏营养物质，而且也有可能引起培养液中某些有害物质的生成，从而影响培养过程的顺利进行。在实际生产中，也可能遇到所供蒸汽不足、温度不够高的情况，这时可以适当延长**时间。生产上甚至有用100℃蒸煮而达到彻底**的实例。如要做固体曲而没有高温蒸汽时，可将原料用100蒸汽蒸30min，杀死其中的营养细胞，但孢子与**的芽孢没有被杀死。MEM培养基是细胞生物学研究中的基础培养基之一。

    按中华******典2005年版二部附录ⅧL干燥失重测定法进行。渗透压溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度溶液扩散的现象称为渗透，阻止渗透所需施加的压力，称为渗透压。细胞必须生活在等渗环境中，动物细胞借助K＋、Na＋维持渗透平衡。大多数细胞对渗透压有一定的耐受性。但是培养液渗透压过高容易使细胞脱水萎缩，培养液渗透压过低容易使细胞膨胀破裂，因此要控制培养基的渗透压范围。按中华******典2005年版二部附录ⅨG渗透压摩尔浓度测定法进行。**内*****内***是许多病原性**所产生的***。它的特殊性在于不是**或**的代谢产物，而是**死亡或解体后才释放出来的一种具有生物活性的物质。培养基**内***过高，对生物制品*苗（如狂犬、乙肝*苗）、基因工程*品等注射用的*品都需要检查**内***。因此本项目的检验符合生物制品质量控制要求。常规细胞培养基的**内***标准定为＜10EU/ml。称取本品规定量（见表4-12）的1/100，加入**内***检查用水10mL溶解，吸取该溶液mL加**内***检查用水mL，混匀即得试样。按中华******典2005年版二部附录ⅪE**内***检查法中的凝胶法进行。微生物限度细胞培养基不是无菌产品，其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖。使用减血清培养基能减少细胞应激反应。陕西减血清培养基进口

F12培养基在细胞分化和基因表达研究中有重要应用。中国香港MEM培养基答疑解惑

    C）大肠埃希菌＋＋－－产气肠杆菌－－＋＋志贺菌属－＋－－沙门菌属－＋－＋表硫化氢和尿素酶试验对肠杆菌属的鉴别试验伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌变形杆菌志贺菌属大肠埃希菌克雷伯菌属硫化氢试验－/＋＋＋＋＋＋＋－－－尿素酶试验－－＋－－＋乳糖发酵试验－－－－＋＋在培养基中加入指示剂或某种化学物质**不需要的**生长，利于需要的**分离，这种培养基称为选择性培养基。常用的抑菌剂有胆盐、煌绿、玫瑰红钠、亚硒酸钠等。常用的指示荆有溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等。美蓝是氧化还原指示剂。例如，在培养基内加入青霉素可**革兰阳性**，而利于革兰阴性**的生长；如果加入链霉素，则可获得与加青霉素相反的选择效果；加入制霉素可*****，有利于**的分离。又如亚**铋琼脂，既能**革兰阳性**生长，又能**许多革兰阴性**生长，但伤寒沙门菌却能在这个培养基上生长出具有棕色环的菌落。SS琼脂是临床**检验中一种常用的选择性培养基。大肠埃希菌在SS培养基上，因发酵乳糖而产酸，使指示剂中性红变深，并使胆盐沉淀，所以菌落红色而不透明。沙门菌分解含硫氨基酸而产生硫化氢，硫化氢与枸橼酸铁形成硫化铁，所以菌落中心呈黑色。痢疾志贺菌，既不发酵乳糖也不产生硫化氧。中国香港MEM培养基答疑解惑