湖南HE染色分析

HE染色细胞浆染色原理：细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。HE染色是病理实验中比较用的一种基础染色方法。湖南HE染色分析

HE 染色是病理的主要常規染色，其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y，藉由電荷與吸附性的差異，組織結構對不同染料的結合程度不同，我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核，Eosin Y則表現在細胞質與間質，染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異，而且每個實驗室需要的顏色深淺不一，使用者可以依自己的需求另行調整，以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟山东质量好的HE染色报告常规HE染色和特殊染色服务。

HE染色脱蜡不净的原因及验证方法：1)二甲苯使用过久，含蜡成分太高或脱蜡效果差：可更换二甲苯验证。2)切片经烤片，冷却后放入二甲苯脱蜡或室温太低；延长拖拉时间或用热的切片脱蜡验证。3)脱蜡时间太短或振荡太少，幅度太小；可延长脱蜡时间或以多振荡来验证。4)洗涤二甲苯用的乙醇使用时间过久，导致乙醇中二甲苯含量过高，二甲苯残留在切片上（由于二甲苯与水不相溶，切片上有二甲苯的地方，苏木精就没有办法渗透进去，在切片染色完成后留下了点状的不着**域）：更换各道乙醇验证。5)二甲苯、乙醇质量不佳（偶有试剂瓶内装的试剂与试剂名不相符）：换批号验证。6)更换脱蜡液体时试剂拿错：需重新配置验证。7)更换脱蜡液体时试剂次序放错：需重新配置验证。8)烤片时间短，切片上水分没有烤干，也会导致着色不匀，出现点状发白区域。

HE染色反蓝的原理：苏木素染液，细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色，称蓝化作用，一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水比较好）变蓝。HE染色(脱蜡、水化、染色、脱水、封片) - 实验方法。

HE染色石蜡和冰冻切片样本的处理，样品处理：a.对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟;无水乙醇5分钟;90%乙醇2分;70%乙醇2分钟;蒸馏水2分钟.b.对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。c对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。浸自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。95%乙醇5秒。伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。HE染色，优先南京英瀚斯生物。山东结果客观的HE染色外包

脾脏组织HE染色如何观察。湖南HE染色分析

HE染色伊红着色淡分析及应对原因：（1）伊红染液的pH值可能大于5；（2）蓝化液残留过多；（3）切片太薄；（4）切片经伊红染色后在乙醇脱水时间过长。对策：检查伊红染液的pH值，如果必要的话，用乙酸将其调节在4～5之间，从而使伊红染色彩艳丽。确保每次蓝化步骤完成后，使用的弱碱性溶液被充分洗去，玻片上没有残留的弱碱性溶液。检查切片的厚度。脱水时不要让切片在低浓度乙醇停留时间过长，因为含水多的低浓度乙醇会将伊红的颜色分化掉。湖南HE染色分析