干细胞培养血小板裂解液沉淀

为了排除肝素对于细胞增长的抑制作用可能与防腐剂（这里采用苄醇作为防腐剂添加到UFH或LMWH中）有关。我们对不添加防腐剂的肝素进行了相同实验，结果对AT-MSC和BM-MSC细胞增殖抑制趋势相同。在随后的传代培养到3代中的累积的群体中，两种肝素UFH和LMWH对MSC增殖的影响也变得明显，血小板裂解液中肝素浓度较低时累积细胞群体倍增指数(cPD)较高。CFU-F的塑料粘附生长性能是MSCs培养的先决条件，在96孔板中通过有限稀释的方法结合泊松统计进行CFU-F试验，显示集落形成率CFU-F在高浓度UFH时中度降低，而在高浓度Enoxaparin（LMWH）时明显降低。这些结果表明高浓度的LMWH减少了CFU-F的形成，这与已报道的其他研究结论一致。

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MSCs在添加10% 血小板裂解液和不同浓度肝素的培养基中培养7天，随后使用MTT法评估增殖。脂肪组织源性间充质干细胞（AT-MSC）和骨髓源性间充质干细胞（BM-MSC）培养的过程中，如果使用的UFH浓度低于0.61 IU/mL或者使用Enoxaparin（LMWH）浓度低于0.024 mg/mL (2.4 IU/mL) 时培养液均呈现凝胶状态（灰色背景），而肝素浓度过高则对细胞增殖的负面影响明显且以剂量依赖的方式提高。备注肝素浓度单位换算：肝素浓度国际单位(IU)衡量，1IU国际单位是指在规定的条件下，将1ml全血延长凝血3分钟所需的量：1mg大约相当于100IU的肝素。 更多关于Sexton人血小板裂解液的相关产品问题，欢迎咨询上海曼博生物！

胎牛血清(FBS)对动物和人的间充质干细胞(MSCs)的大规模扩增以及细胞zhi liao的快速发展起着重要作用，但它也带来了一些监管和物种交叉污染等问题，并阻碍了大多数产品往临床的过渡。无血清培养基(SFM)补充几种生长因子也被提出作为胎牛血清综合征的替代方法，然而通常SFM需要根据细胞类型、来源和种类开发定制，费时费力。此外，SFM的高成本使其无法用于大规模细胞扩增。因此，迫切需要找到一种基于人源的培养基补充剂。人源血小板裂解液(HPL)来自人血小板，含有类似的生长因子和细胞因子，且与在胎牛血清中发现的水平相当。目前已经证明HPL支持各种细胞的生长。本研究的重点是评估不需要使用肝素(PL-NH)的HPL和需要肝素(PL-H)的标准HPL在不同浓度培养基下支持来自不同组织的新生儿和成人间充质干细胞的生长和增殖的能力。血小板裂解液为什么要使用肝素？

间充质间质细胞(MSCs)体外扩增的培养基一般添加胎牛血清FBS，但是考虑到异种ganran及免疫反应的风险，监管机构并不鼓励使用。人血小板裂解液除了不存在异种免疫反应或牛病原体ganran的风险，有助于增强间充质干细胞的扩增，也相对容易地根据良好的生产规范程序生产，并已用于临床应用，因此现如很多资料显示血小板裂解液已被证明是扩增MSCs一种非常有效的FBS替代方法（参考文献1）。 血小板裂解液由血浆组成，含有纤维蛋白原和凝血因子，对于一般细胞培养中涉及的含钙培养基来说通常需要加入抗凝剂（常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等）来防止凝胶形成，其中肝素很为常用。 更多关于Sexton血小板裂解液相关产品问题，欢迎咨询上海曼博生物！血小板裂解液里面有沉淀对细胞有影响吗?达优血小板裂解液的组成

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