苜蓿疫霉
关键词: 苜蓿疫霉 生物资源
2026.01.13
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堀越氏芽孢杆菌(Bacillus horikoshii)是20世纪90年代由日本科学家堀越等从碱性温泉沉积物中分离出的嗜碱菌,也是国际公认的模式菌株(ATCC 700161)[ ^82^ ][ ^84^ ]。菌体杆状、革兰氏阳性,可形成椭圆芽孢,更适pH 8.5–9.5、温度30–37 ℃,在Na₂CO₃浓度50 g L⁻¹的极端环境中仍能正常代谢,被称为“天然碱性细胞工厂”。一、耐碱机制基因组编码多拷贝Na⁺/H⁺逆向转运蛋白(mnh、nhaC)和碳酸酐酶,可将胞内多余Na⁺排出,并将CO₃²⁻转化为HCO₃⁻,维持胞内pH稳态;细胞壁肽聚糖含高比例二氨基庚二酸,增强膜稳定性,为高温高碱酶的高效表达提供平台。二、工业酶潜力其耐碱淀粉酶、普鲁兰酶更适pH 9–10,90 ℃半衰期>2 h,已用于淀粉糖化“一步法”,可省略传统工艺中的中和环节,节能15 %;耐碱蛋白酶在洗涤剂中可去除血渍、奶渍,低温活性优于市场同类酶20 %。三、农业与环境应用菌株P1具备“溶磷-钝化重金属”双重功能:在pH 9、Cd²⁺ 50 mg kg⁻¹条件下,仍可将难溶磷酸钙转化为磷277 mg kg⁻¹,同时胞外多糖吸附Cd²⁺,使水稻籽粒镉含量下降35 %,产量提高18 %。
生物资源
嗜气芽孢杆菌(Bacillus aerophilus)是芽孢杆菌属里的“氧气狂热者”,2004年随以色列高空气球首先被分离,可在0.8–21 % O₂范围内旺盛生长,更适氧分压高于普通土壤芽孢杆菌2倍,故得名“嗜气”。其菌落呈乳白色、边缘卷发状,革兰氏阳性,具周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐紫外、耐干燥,货架期长达3年,为制剂化提供质量载体。在土壤复苏后,嗜气芽孢杆菌迅速启动“三效机制”:①分泌吲哚乙酸(IAA)25 mg/L,刺激玉米、番茄根系增长30 %;②产蛋白酶、纤维素酶,分解作物残体,释放养分;③合成表面活性素、fengycin,对番茄青枯、辣椒疫霉抑菌带宽达28 mm,且能诱导植物ISR,降低农药用量40 %。田间试验显示,每亩用200 g菌粉(10⁸ CFU/g)拌种,小麦返青期根际磷提高32 %,千粒重增1.8 g,产量提升8.5 %;在大棚番茄上,滴灌菌液可使灰霉病指下降45 %,果实Vc含量提高12 %,糖酸比更协调。工业端,嗜气芽孢杆菌是“低温酶工厂”。其耐有机溶剂蛋白酶在15 ℃、30 %乙醇中仍保持70 %活性,可用于洗涤剂;耐碱脂肪酶更适pH 10,适用于乳制品CIP清洗,节能20 %。薛瓦酵母其IAA产量达118mg/L,明显高于同属菌株,可刺激小麦根长增加35%,干重提高28%。

扩散芽孢杆菌(Bacillus diffusus)是芽孢杆菌属里的“运动健将”。菌体杆状、周生鞭毛,在琼脂表面可形成迅速扩展的薄膜状菌落,24 h内直径达80 mm,故得名“diffusus”。其更适生长温度30–37 ℃,pH 6–9,耐干燥、耐紫外,芽孢可存活十年以上,为制剂化提供质量特性。一、快速定殖菌株DSM 13271分泌大量胞外多糖,降低表面张力,使菌体在沙壤土中迁移速度提高3倍;与枯草芽孢杆菌复配,可形成“生物被膜”,优先占据根际生态位,抑制病原菌入侵。二、广谱抑菌扩散芽孢杆菌产生diffusin脂肽,对番茄青枯、辣椒疫霉、棉花黄萎等病原菌抑菌带宽达28 mm;温室试验显示,亩用200 g菌粉滴灌,黄瓜枯萎病指下降45 %,农药用量减少三分之一。三、促生提质菌株IAA产量25 mg·L⁻¹,溶磷2.9 mg·L⁻¹,并产挥发性2,3-丁二醇,诱导玉米侧根增30 %,吸磷量提20 %;新疆盐碱地示范,冬小麦千粒重增1.5 g,产量提高8 %。四、工业酶潜力其耐碱蛋白酶在pH 10、50 ℃下活性比较高,已用于洗涤剂,低温去污力提升25 %;胞外多糖乳化力强,可作为钻井泥浆降滤失剂,耐盐达12 %。
PTYG培养基(Peptone-Tryptone-Yeast Extract-Glucose Medium)是一种高营养、通用型液体培养基,由蛋白胨、胰蛋白胨、酵母粉和葡萄糖四种关键成分组成,故名“PTYG”。其配方通常为蛋白胨5 g、胰蛋白胨5 g、酵母粉5 g、葡萄糖10 g,NaCl 5 g,补水至1 L,pH调至7.0±0.2,适用于大多数异养细菌、酵母及丝状菌的快速增殖与代谢研究。该培养基营养,蛋白胨与胰蛋白胨提供多肽与氨基酸,酵母粉富含维生素B群与微量元素,葡萄糖作为碳源,能迅速启动微生物代谢,缩短延滞期。在常规培养条件下,大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌等常见菌株在37℃、180 r/min培养12小时即可达到对数后期,菌浓可达10⁹ CFU/mL以上,适合用于质粒提取、蛋白表达、酶活测定等下游实验。此外,PTYG培养基也常被用于益生菌(如双歧杆菌、乳酸菌)的高密度发酵,若需增强选择性,可添加0.05% L-半胱氨酸和0.1% Tween-80,以提高厌氧菌的生长效率。若制备固体平板,只需加入1.5%琼脂,即可用于菌落计数、分离纯化及菌株保藏。由于其成分明确、配制简便、适用广,PTYG培养基已成为微生物实验室中不可或缺的“基础口粮”,在基础研究、工业发酵、食品微生物检测及教学实验中均发挥着重要作用。菌株2-2a对大豆炭疽、黑斑、灰斑等叶部病害及根腐、立枯等土传病害兼具防效,且定殖速度快。

肉汤培养基(测磷细菌菌数)是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子;磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙,经球磨过300目,悬于蒸馏水中呈乳白混悬液;pH调至7.0±0.2,分装试管后121℃灭菌15 min,冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂,培养基既保持肉汤的高营养促生优势,又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”,可同步完成溶磷功能验证和菌数测定,适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数(MPN)法:将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释,各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管,每稀释度3重复,28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解,培养液由乳白→局部透明→全管澄清,并伴随菌膜形成;非溶磷菌虽可增殖,但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管,查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数,全程只需3天,比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋混匀;若肉汤本身含磷(牛肉膏批次差异),可先用磷钼蓝法测可溶磷,超过5 mg L⁻¹即弃用。由于其耐辐射特性,它被泛用于研究微生物在极端环境下的生存机制。木蝴蝶假诺卡氏菌
它属于水螺菌属,是一种革兰氏阴性菌,泛存在于自然环境中。苜蓿疫霉
高岛氏胶珊瑚菌(Holtermanniella takashimae)是近年来备受关注的珍稀胶质菌,隶属于银耳目,因日本学者高岛首先分离而得名。它通体晶莹剔透,状若海底珊瑚,色泽由纯白到淡黄,质地柔软富有弹性,晒干后收缩成轻薄菌片,复水即恢复原有形态。该菌多生长在海拔500至1500米、湿润凉爽的常绿阔叶林中,常与壳斗科植物形成浅层菌根,对酸性土壤和空气洁净度要求极高,故又被视为森林健康的指示物种。成分分析显示,高岛氏胶珊瑚菌的粗蛋白含量可达干重的55%,氨基酸组成均衡,富含赖氨酸、苏氨酸等人体必需氨基酸;其特有的大分子β-葡聚糖与酸性杂多糖具有明显的免疫启动与抗氧化活性,能明显提升实验动物巨噬细胞的吞噬能力,对自由基DPPH的率高于常见银耳20%以上。此外,菌体中钙、铁、锌等微量元素及维生素B1、B2、D前体含量亦居食用菌前列,为开发天然营养补充剂提供了质量原料。在传统食用方式上,高岛氏胶珊瑚菌以清炖、冰糖羹、菌菇火锅更为常见。其胶质丰厚,久煮不烂,口感滑润,可吸附汤汁精华,入口带淡淡坚果香。现代食品科技则将其超微粉添加到面包、酸奶或植物饮料中,既提升膳食纤维含量,又赋予产品独特爽滑口感。苜蓿疫霉
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