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外泌体研究常见问题解答91.外泌体的分离方法有哪些，哪种更好？分离是进行外泌体研究关键的一步，只有选择了合适的方法才能得到理想的实验结果。分离方法包括：超速离心、尺寸排阻、免疫磁珠、聚合物沉淀、亲和磁珠/膜等方法。根据外泌体的大小，密度和表面标志物的不同进行分离，不同提取外泌体方法优劣势比较，受限于篇幅，详细版请联系维思克思生物科技获取。2.细胞培养上清中死细胞对外泌体分离的影响？在细胞凋亡/死亡过程中会释放大量Evs，会混入活细胞分泌的外泌体中，而目前的外泌体分离方法并不能将两者区分开来。所以在收集细胞培养上清样本时，需要保证细胞活率应不小于95%。3.大体积的样本类型，如何分离外泌体？大体积样本，如细胞培养上清、尿液等，可以先浓缩样本（如超滤或外泌体浓缩试剂等），减少样本体积，再使用常规的外泌体分离方法。4.复杂的样本类型，如何分离得到高纯度的外泌体？复杂的样本类型如血清、血浆、奶制品、脑脊液等，含有很多与外泌体在尺寸和密度接近的杂质，常规的外泌体分离方法难以获取高纯度的外泌体，建议使用亲和的外泌体分离方法，如PS亲和、免疫亲和、膜亲和等外泌体分离试剂盒。外泌体研究工具复溶后稳定性强，多次使用不影响效果，减少浪费。EVs标准品

高纯度外泌体冻干粉维思克思提供多种外泌体冻干粉，包括不限于来源于人脐带间充质干细胞外泌体、HEK293外泌体、NK外泌体、牛奶外泌体、植物外泌体等。这些外泌体是通过切向流过滤、多种层析技术等纯化方式，经优化的冻干工艺制得高纯度、品质优良的外泌体。经严格质量控制，可用于外泌体常用研究，包括外泌体功能实验、示踪、载药等多种实验。产品优势：高纯度，纯度高达1E+11Particles/mg（可定制专属项目标准品）。高完整性，本品电镜视野下，外泌体形态完整。稳定性好，以冻干粉形式，4℃保存，有效期2年。质检严格，经多项的质检，保证产品质量。产品信息：具体外泌体标准品清单请联系客服获取。大规模Extracellular Vesicles工程化外泌体研究工具一站式采购方案，省去多渠道比价，降低采购时间成本。

大体积外泌体样本量处理方案大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用，衔接不同的外泌体分离纯化方法，见下文。01外泌体分离纯化对于外泌体的分离纯化，市面上已有许多方法。维思克思总结出常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱基于分子排阻色谱原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体，实现超快速、高收率的外泌体分离。磁珠法外泌体分离试剂盒能特异性捕获外泌体而不吸附杂质，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。02外泌体RNA提取在外泌体RNA提取步骤中，常用的是磁珠法和沉淀法。磁珠法外泌体总RNA提取试剂盒能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率提取，特别适用于血浆、血清等复杂样本RNA提取。沉淀法外泌体总RNA提取试剂盒，于外泌体微量RNA的提取，具有提取效率高、提取的RNA种类多、回收的miRNA含量高等特点。

氯仿买不到？维思克思包有的Trizol法提取RNA是生物实验中常用的RNA提取方法，然而使用该方法也伴随着不少困扰。比如，氯仿属于管制试剂，难以购买！比如，氯仿属于剧毒试剂，使用时气味十分难闻！如果你也遇到以上问题，为什么不选择一款更安全、更环保、使用效果和氯仿相同的氯仿替代物呢？产品特点：安全环保，购买方便；传统抽提试剂氯仿属于危险化学品，可引起急性中毒以及致。本产品与氯仿相比毒性更小，更安全、环保；分层效果明显，本产品有更强的疏水性，水相分层更为明显，易于吸取，手残党友好；RNA质量和得率无差别，提取出的RNA得率及质量与氯仿提取出的五明显差异，可完全替代氯仿；用量小，一瓶更耐用，相较于氯仿，本品抽提RNA时，操作步骤相同，但用量为氯仿的一半，更耐用；适用范围广，可适用于各种动植物细胞、组织以及微生物样本的RNA提取。产品信息：RNAExtractionAgent（WZ13）。外泌体研究工具高效分离技术，缩短实验周期，提升研究进度效率。

你真的知道如何正确收集和保存EVs吗？样本的收集和保存是导致实验结果不确定性的一个重要来源。维思克思长期研究以及不断试错得出的“EVs样本收集和保存”经验，分享给各位外泌体研究者。血液。血液采集优先隔夜空腹。血浆通常是EVs的优先来源，因为在制备血清时凝块形成期间会释放额外的EVs。目前，血清的主要应用是研究miRNA。要制备血浆，血液需要抗凝。细胞培养上清分离EVs。污染EVs和可检测到的非EV组分的主要来源是培养基中的血清。如果细胞不能在无血清培养基中生长，获取的EVs将不再纯净，后续研究结果也将不准确。建议超速离心从血清中去除EVs或购买不含EV血清（WSC0020）；培养中监测细胞活率，确保大于90%，否则会释放凋亡小体和细胞碎片等其他囊泡，影响实验。WSR0020-3采用独特配方，可减少EVs的损耗；在动物实验中，无蛋白配方可明显降低毒性反应。冻存保护剂选型若需要进行冻干处理，选择WSR0020-3（冻干兼容）；若用于动物注射实验，选择WSR0020-3（无蛋白配方，低内）；若-80℃短期保存，选择WSR0020（经典款，性价比推荐）。外泌体研究工具全流程质量管控，从生产到售后，保障实验可靠性。血清外泌体代谢组

外泌体研究工具区域化仓储配送，缩短到货时间，保障实验连续性。EVs标准品

外泌体表征系列产品线目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。维思克思全新系列产品—外泌体表征与定量试剂盒，该系列产品可对现有单一表征与定量方法进行补充，通过多维度对分离出的外泌体进行评估，使实验数据更加科学、准确。01BCA蛋白定量试剂盒（WSR0022），具有灵敏度高、显色速度快、线性范围广的优势，可高效快速实现蛋白定量。02脂质定量试剂盒(WSR0028/WSR0028-2)，现有的脂质定量方法大都需要昂贵的仪器，本产品可代替大型仪器，实现小成本快速检测，具有灵敏度高、操作简便、线性范围广等优势。03外泌体RNAQC试剂盒（WSR0013-1），经大量研究分析，筛选出2个阳性外泌体RNA靶标和1个阴性靶标，用于表征RNA质量。04外泌体蛋白标志物鉴定试剂盒（WSR0030），针对外泌体标志蛋白CD9、CD81、TSG101、Calnexin检测而研发的一款方便高效的试剂盒产品，可监测实验体系并准确检测到外泌体中的以上蛋白。05外泌体RNA定量试剂盒（WSR0039），检测线性范围是0-25ng，比较低检测限可至0.2ng，灵敏度高。EVs标准品

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