AatII

关键词: AatII 标准物质

2026.04.01

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Cre重组酶在基因编辑中的操作主要涉及以下几个步骤:1.**识别与结合**:-Cre重组酶首先识别并分别结合两个LoxP序列的两个反向重复序列,形成一个二聚体。2.**四聚体形成**:-两个二聚体互相靠近,形成由四个Cre分子与两个LoxP位点结合形成的四聚体复合物。3.**DNA切割与交换**:-Cre重组酶在每个LoxP位点的间隔序列中引导单链切割,产生带有3’端羟基的断裂。每个LoxP位点的两个单链分别被切割。切割产生的自由3’端与对侧的3’端进行交换和重连,形成Holliday交叉结构。4.**分子重组与解旋**:-Holliday交叉结构通过Cre酶的作用被解旋并重组,形成新的重组产物。这个过程导致两个LoxP位点之间的DNA序列被删除、反转或易位,具体效果取决于LoxP序列的排列方式(方向和位置)。5.**条件性基因编辑**:-通过建立特异性Cre小鼠,该小鼠中的Cre重组酶由特定启动子驱动,可在特定细胞或组织或全身表达Cre重组酶。与带有Lox位点的Flox小鼠杂交,子代中可以获得既带有Cre又带有Flox基因的小鼠,实现条件性基因打靶(表达或敲除靶基因)。Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)含有经过配体修饰的热稳定Taq DNA聚合酶,并配备优化的缓冲体系。AatII

AatII,标准物质

SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX)是一种为实时荧光定量PCR(qPCR)设计的即用型预混液,适用于需要低浓度ROX校正染料的qPCR仪器。该产品结合了SYBRGreenI荧光染料和优化的反应体系,能够实现有效、特异的基因定量检测。产品特点有效热启动酶:采用化学修饰的TaqDNA聚合酶,结合抗体或化学修饰技术,有效抑制低温下的非特异性扩增,提高反应的特异性和灵敏度。优化的反应体系:包含优化的qPCRBuffer、dNTPs、SYBRGreenI荧光染料和低浓度ROX,适用于多种qPCR仪器。低浓度ROX:适用于需要低浓度ROX作为校正染料的qPCR仪器,如ABI7500、ViiA7、QuantStudio系列等。高灵敏度与宽线性范围:能够在宽广的模板浓度范围内获得良好的标准曲线,适合低丰度基因的检测。总之,SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX)是一种有效、特异的qPCR试剂,适用于多种qPCR仪器,能够明显提高基因定量检测的准确性和灵敏度。SdaI (SbfI)在MAGE-A3基因序列的C末端添加His标签和Avi标签序列。His标签有助于通过金属螯合亲和层析进行蛋白纯化。

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ROR1属胚胎期I型受体酪氨酸激酶,成年后沉默复现于多种实体瘤与血液恶病,成为“病胚”标志物与ADC、CAR-T热门靶点。本品采用HEK293真核表达,覆盖胞外完整Ig-like/Frizzled/Kringle结构域(aa30-406),C端6×His标签经Ni-NTA两步纯化,纯度≥98%,内素<0.05EU/μg,糖基化与天然构象经质谱与圆二色谱双重验证。功能层面,重组ROR1以高亲和力结合Wnt5a(KD=4.7nM),可剂量依赖启动非经典通路,诱导乳腺病细胞迁移;在体外阻断实验中,50ng/mL即可抑制Wnt5a介导的ROR1-FZD复合体形成。His标签支持ELISA、SPR与细胞染色多重应用,加速抗体筛选、ADC内化效率及CAR-T抗原密度测定。该蛋白为解析ROR1驱动病干性与免疫逃逸机制,以及下一代精细疗法开发提供了标准化、高活性的关键材料。

T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。FnCas12a的双链或单链DNA靶标都能激发其反式剪切活性,即在形成三元复合物后,针对非特异序列ssDNA的剪切。

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ProbeqPCRMix(2×,LowROX):高特异性与低背景校正的qPCR解决方案ProbeqPCRMix(2×,LowROX)是一种为探针法实时荧光定量PCR(qPCR)设计的即用型预混液,适用于需要低浓度ROX校正染料的qPCR仪器。该预混液结合了热启动TaqDNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及低浓度ROX,能够实现高效、特异的基因定量检测。产品特点高特异性和灵敏度:采用抗体修饰的热启动TaqDNA聚合酶,有效减少非特异性扩增,提高检测灵敏度。低浓度ROX校正:适用于需要低浓度ROX作为校正染料的qPCR仪器,如ABI7500、ViiA7、QuantStudio系列等。防污染系统:部分产品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能够有效降解含尿嘧啶的PCR产物,防止假阳性。快速反应:支持快速qPCR程序,可在短时间内完成检测,提高实验效率。操作简便:2×预混液设计,只需加入引物、探针和模板即可进行反应,减少了操作步骤和污染风险。应用场景基因表达分析:用于定量检测特定基因的表达水平。病原体检测:快速检测病毒、细菌等病原体的DNA。SNP分型和拷贝数变异分析:通过探针法实现高特异性的基因分型。多重qPCR:可在同一反应中同时检测多个目标基因。预混液的无染料配方使其适用于多种后续应用,如凝胶电泳分析、测序或克隆,而无需担心染料对结果的干扰。Recombinant Human CD89 (His Tag)

AdvanceFast PCR Master Mix采用了改良型的高保真DNA聚合酶,能够在极短时间内完成PCR扩增。AatII

在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的重要工具,而Hot-StartTaqMasterMix(2×)(WithoutDye)则是提升PCR特异性和效率的关键试剂。这种预混液结合了热启动技术和优化的反应体系,为准确的基因扩增提供了强大的支持。Hot-StartTaqMasterMix(2×)(WithoutDye)是一种即用型的2倍浓度预混液,包含了Hot-StartTaqDNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及增强剂。其优点在于热启动技术的应用。通过在常温下抑制Taq酶活性,该预混液有效避免了非特异性扩增和引物二聚体的形成,从而提高了PCR反应的特异性和灵敏度。这种特性尤其适用于复杂模板(如高GC含量或低丰度基因)的扩增,以及对特异性要求较高的实验场景。此外,该预混液不含染料,为实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据具体需求选择后续的检测方法,例如凝胶电泳分析、DNA测序或克隆。这种无染料设计也使得预混液适用于多种下游应用,而不会对结果产生干扰。Hot-StartTaqMasterMix(2×)(WithoutDye)的2倍浓度设计进一步简化了实验操作。实验人员只需加入模板DNA和引物,即可直接进行反应,减少了手动配制反应体系的步骤和可能出现的误差。这种效率、便捷的特性使其成为分子生物学实验室的理想选择。AatII

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