电转染试剂

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖。因此，它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系，它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命（即它们是有限细胞系），且随着传代的进行，具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位，从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说，这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便，尤其是稳定转染的克隆传代。包括**常见的DNA，用于基因编辑的siRNA，能够更快表达蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是体内转染。电转染试剂

产生慢***的比较通过LipoD293™试剂（升级版）和LipofectamineLTX（LTX）试剂将三个cDNAs共转染进293T细胞。一个GFP载体，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用来测定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T细胞，其次是分别添加不同量的慢定都上清液，1微升（上图）和10微升（下图）。5天后，细胞通过流式细胞仪检测。右上角的数字表明转导的细胞的百分比来测定慢***的滴度。由LipoD293™andLTX产生的慢***的滴度被量化，分为是8x10^6和3x10^6tu/ml。电转染试剂转染产品知多少——siRNA转染试剂.

转染是将外源核酸导入真核细胞的过程，是细胞和分子生物学研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了"，真所谓辛辛苦苦实验N多回，一夜回到解放前……众所周知，影响转染成功的因素非常多，包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同，现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。

细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法：生物转染，物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体，以慢***、腺***和腺相关***等**常见，其侵染效率可以达到90%以上，但常因安全性等问题，很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***，无论哪一种都需要特定的设备，且一分钱一分货，性能好的价格也都很性感电转化化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法，主要包括两类：阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。临床级******毒载体生产必备转染试剂..

对CHO细胞转染效率的比较右图：使用以上转染试剂将编码荧光素酶蛋白的cDNA（phRL-CMV）和绿色荧光蛋白GFP的cDNA按照生产商的提供的转染步骤分别转染到CHO细胞。在转染24小时后，荧光素酶的活性使用Beckman公司的化学发光监测器测定；GFP阳性细胞率使用BD公司的FACS检测。左图：LipoD293试剂（升级版）和Lipofecatmine2000（L2K）,TransIT以及Fugene6的价格比较（美元/1000微升）。所有的价格是从生产制造商的网站上收集对CHO细胞转染效率的比较右图：使用以上转染试剂将编码荧细胞转染必备——高效低毒转染试剂.Opti-MEM转染试剂供应商

赛默飞提供了多种高质量的转染产品，适用于各种细胞类型的转染。电转染试剂

.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。高灵活应用，同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。电转染试剂

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