宁夏HE染色分析

HE染色不管怎么操作，始终无法染色或淡染答：这种情况一般因为组织固定时采用了酸性甲醛;或者组织在甲醛中浸泡时间太长;或者久置的甲醛变性分解为甲酸。补救：防患于未然，要么使用新鲜的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一点碳酸钠中和甲酸。对于已经固定的组织可考虑再次固定；对于已经制出的片子，染色前采用5%重铬酸钾溶液浸泡半小时以上，然后自来水漂洗5min，可改善染色。也可以将切片放入3%硫酸铁铵溶液中，补充染色媒介，增强苏木素与组织的亲和力(苏木素染色必须要媒介才能染上，单纯的苏木素与组织的亲和力很弱)。心脏组织HE染色如何观察。宁夏HE染色分析

HE染色原理：一、细胞核染色原理：苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外。使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。二、细胞浆染色原理：细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比宁夏HE染色分析HE染色需要哪些材料及实验步骤。

HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。

HE染色实验步骤：（1）样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。（2）样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。（3）染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。（4）分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。（5）染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。（6）吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可HE染色取材和样本保存方式。

HE染色常见问题：Q5：细胞核呈棕红色改变答：苏木素染液过度氧化；或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8)，或在稀释的氨水溶液，或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡，这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6：伊红染色较淡答：伊红的PH改变了(PH可能已大于5)；或反蓝液体未漂洗干净，残留后影响胞浆嗜酸性染色；或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策：检查伊红染色液PH，可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示，调整实验步骤。HE染色原理 试剂 染色步骤 注意事项 。江苏病理HE染色检测

脾脏组织HE染色如何观察。宁夏HE染色分析

HE染色攻略：HE染色又称为苏木精-伊红染色，染色后组织或细胞可以借助普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围***，对组织细胞的各种成分都可着色，便于***观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。可以观察细胞结构、组织层次等等。首先切片组织是否完整，组织有无损伤；然后看切片有无刀痕；***细胞核是否清晰可见，胞核与包浆要对比鲜明。宁夏HE染色分析